| Дейност 1. Извършване на изследвания, изпитвания и измервания, необходими за разработването на продуктова иновация. Разработване на китове за образен цитометър "Hand-held" с приложение в биотехнологичната промишленост: Китовете представляват активните реагенти които взаимодействат с анализирания компонент и реално чрез китовете се осъщeствява функционирането на образен цитометър. Извършването на изследвания, изпитвания и измервания, свързани с разработването на иновативни китове, необходими за разработвания прототип образен цитометър "Hand-held" за биотехнологични цели е една от ключовите задачи за реализация на проектните цели. Ето защо, тази дейност ще се изпълнява дълго (14 месеца). Ще бъде нает квалифициран персонал от Университет „проф. д-р Асен Златаров” Бургас - 3 експерти (1 микробиолог и 2 биотехнолози) и 2 завършващи докторанти. Ще се използва оборудването на партньора за създаването на два вида китове за определяне на броя на дрожди и бактерии с помощта на разработвания прототип. На първо място ще бъдат закупени консумативите и реагентите, необходими за китовете. На 2 месец от изпълнението на проекта ще бъдe нает квалифицирания персонал и той ще бъде зает от 2 месец до 15 месец. През целия период ще бъде използвано собствено оборудване - спектрофотометър във видимата и ултравиолетова област, гелна хроматография, спектрофотометър, флуоресцентен микроскоп, лиофилизатор и др. Аналитичните китове са неразделна, необходима част за работа на прототипа и тяхното разработване изисква квалифициран персонал с голям опит в областта на микробиологията и аналитичната химия. В рамките на тази дейност ще се осъществят следните основни стъпки, поотделно за двата вида китове:
Кит за определяне на общ брой дрождеви клетки и броя на живи и мъртви дрождеви клетки: Определяне на състава и на концентрациите на отделните съставки на кита. Оформление на кита за определяне на дрожди – краен състав, разфасовка, опаковане. Прилагане на китовете в реална оперативна среда в пивоварната в Шумен за проследяване на процеса ферментация. Прилагане на китовете в реална оперативна среда за проследяване на процеса ферментация при производството на биоетанол в гр. Катуница.
Изследване на количеството на избистрящия разтвор необходим за избистрянето на млякото. Подбиране на подходящ протеолитичен и липолитичен ензим, подходящ вид буфер с подходяща концентрация. Проследяване на влиянието на температурата, на времето и на скоростта на разбъркване с ултразвук върху избистрянето на млечните проби. Изследване влиянието на маслеността, рН, броя на соматичните клетки, оптичните свойства на средата, рН на средата, на агрегацията на клетките върху степента на избистряне. Изследване влиянието на концентрацията на флуоресцентно багрило и на скоростта на проникване на багрилото през клетъчните стени. Ще се използва синтезирано от фирма Милкотроник DНK багрило "Sofia Green", което ще доведе до понижаване цената на кита и на анализа. Определяне на степента на разреждане на пробите. Определяне на измервателния интервал за бактериалните клетки и на всички характеристики на анализа – работен интервал, граница на откриваемост, чувствителност и възпроизводимост на резултатите. Изчисляване на коефициента на вариация и относителното стандартно отклонение за всеки анализ за доказване на точността на метода. В началото изследванията ще се провеждат на флуоресцентен микроскоп Олимпус, а след това китовете ще бъдат адаптирани към разработения прототип по проекта - образен цитометър "Hand-held". Сравнение на получените резултати с резултатите получени по референтните методи. Оформяне на методика за работа за определяне на общ брой бактериални клетки и в мляко и оформление на кита за определяне на бактерии – краен състав, разфасовка, опаковане. Прилагане на китовете в реална оперативна среда за проследяване на количеството бактерии в прясно издоено мляко в дадена ферма. Анализиране и обобщаване на резултатите във вид на отчет. |
73 886.00
|
219 771.64
|
| Дейност 2.Извършване на изследвания, изпитвания и измервания, необходими за разработването на продуктова иновация. Разработване на китове за образен цитометър "Hand-held" с приложение в медицината и млечната промишленост: . Разработването на иновативни китове за приложение в медицината е една от ключовите задачи за реализация на проектните цели. Ето защо, тази дейност ще се изпълнява дълго (16 месеца) и ще изисква използването на много средства за закупуване на реактиви и консумативи в рамките на проекта.
Задача 1. Кит за за общ брой левкоцити и за броене на живи и мъртви кръвни клетки – Определяне на оптималният състав на разреждащия буфер, лизиращия разтвор и флуоресцентните багрила; Определяне на работния измервателен интервал; Сравняване на резултатите получени чрез разработения метод с резултатите от конвенционалния микроскопски метод; Изследване на жизнеспособността на клетките при съхранение на кръвните проби при 40 С; Лиофилизиране и опаковане на китовете. Разработваните китове ще бъдат иновативни, тъй като флуоресцентните багрила ще са ново синтезирани багрила, отличаващи се със значителен флуоресцентен добив, без наличие на фон, нетоксични и това прави анализа много по-чувствителен и точен. Провеждане на експерименти в реална среда, в клинична лаборатория, с реални кръвни проби.
Задача 2. Кит за проследяване на активността на стволовите клетки при трансплантация - Синтезиране на конюгати на моноклонални антитела срещу CD34 и CD45 протеини с две различни флуоресцентни багрила; Определяне на оптималният състав и концентрацията на реагентната смес и на лизиращия разтвор; Определяне на работния измервателен интервал; Определяне на коефициента на вариация и стандартното отклонение на анализа; Сравняване на резултатите получени чрез разработения метод с резултатите от конвенционалния микроскопски метод; Лиофилизиране и опаковане на китовете; Ще се изследва стабилността на антителата във времето. Ще бъде подбрана подходяща опаковка за лизиращия разтвор. Разработваните китове ще бъдат иновативни, тъй като конюгатите на антителата с две различни флуоресцентни багрила ще бъдат синтезирани, пречистени и доказани от екипа. Това значително ще понижи цената на кита и съответно на анализа.
Задача 3. Кит за диагностициране на малария в кръвни проби - Определяне на оптималните условия за култивиране на паразитния щам; Определяне на оптималните условия за инкубиране на паразитни клетки с флуоресцентно багрило; Определяне на оптималната концентрация на ДНК багрило (Sofia Green); Лиофилизация на багрилния разтвор; Определяне на оптималният състав и оптималната концентрация на разреждащия разтвор; Определяне на работния измервателен интервал; Сравняване на резултатите получени чрез разработения метод с резултатите от конвенционалния микроскопски метод. Разработваните китове ще бъдат иновативни, тъй като ще бъде използвано синтезирано багрило от фирма Милкотроник "Sofia Green". Това значително ще понижи цената на кита и съответно на анализа. Оформяне на методика за анализа. Този анализ за малария, разработен на прототипа преносим образен цитометър "Hand-held" е иновативация в световен мащаб.
Задача 4. Кит за определяне броя на соматичните клетки в мляко – определяне на оптималния състав и концентрация на кита; определяне на оптималната концентрация на ДНК багрилото "Sofia Green"; Определяне на измервателния интервал, точността на анализа; оформяне на методика; провеждане на анализ в реални проби.
Задача 5. Кит за диференциално определяне броя на соматичните клетки в мляко – получаване и пречистване на поликлонални антитела срещу неутрофили; получаване на конюгати поликлонално антитяло-флуоресцентно багрило; определяне на оптималната концентрация на конюгата и на буфера; определяне на оптималното време на инкубиране на клетките с конюгата, определяне на измервателния работен интервал и на точността и възпроизводимостта на метода; определяне на оптималните условия за лиофилизиране на клетките; оформяне на методика за анализ. Този анализ се разработва за първи път и се явява иновация в световен мащаб.
Всички китове се разработват от 2 до 17 месец. |
103 714.00
|
0.00
|
| Дейност 3. Извършване на изследвания, изпитвания и измервания, необходими за разработването на образен цитометър "Hand-held".: Извършването на изследвания, изпитвания и измервания, свързани с разработването на продуктовата иновация включва изследвания и измервания свързани с разработването на иновативен образен цитометър "Hand-held". Дейността ще се осъществи по следните стъпки: 1. Логистика и управление на проекта - изследване на пазара за необходимите материали и оборудване, закупуване на оборудването материалите и консумативите. 2. Разработване на оптичен модул/микроскоп и осветител/ - Литературно и патентно изследване на проблема откриване на подобни решения с автоматично усилване от 2 до 10 и автоматизиран автофокус с поне 0.1 мм дълбочина, Математическо моделиране на модула с програма ZEMAX в два варианта стандартен обектив състоящ се от стъклени дублети и три течни лещи и с използването на обърнат нископрофилен обектив за използване с два сензора 1/1.8 и голямоформатен 1/1 и използването на иновативни течни лещи, разработка на документация за оптичните лещи за поръчка на производител, Поръчка, Разработка на 3Д модел на SOLIDWORKS на механичните компоненти на модула, Поръчка на необходими материали, Изработване на механичните компоненти, Моделиране на оптичните филтри за различните багрила използвани за китовете за LED излъчвателите и емисионни филтри за различните багрила. 3. Разработване на дихроичен филтър - Технология за производство на тънкослойни филтри, Математическо моделиране на тънкослойни филтри Бандпас лонгпас тип, Проектиране и изработка на приспособления за закрепване на оптичните филтри във вакумната камера, Производсво на оптичните филтри по разработения модел и технология, тестване на оптичните филтри на спектрометър, при отлоконение от очакваните характеристики редизайн на филтрите, 3Д проектиране на автоматизиран стенд за тестване на оптичния модул, Изработка на автоматизиран стенд за тестване на готовия модул, тестване на готовия модул, 3Д проектиране на защитното стакло от сапфир, написване на програма за изработка на ЦНЦ машина, изработка на защитното стъкло на диамантения струг, Изчисление със специализирана програма на антирефлексно покритие с пропускане от 440 нм до 700 нм, Нанасяне на проектираното антирефлексно покритие върху сапфиреното стъкло. 4. Проектиране на микро дихроичен флуоресцентен осветител с 1,2 и три LED с различна дължина на вълната - 3Д проектиране механичните части на осветителя със Солид Воркс, Проектиране на оптичната част с Zemax за 1 ,2 и 3 LED и без с 1 и с 2 дихроични огледала и полимерен дифузьор в пътя на осветителя. 5.Програмиране на обработващи програми за отделните механични детайли на осветителя за ЦНЦ машини - изработка на детайлите на струг фреза и др., Проектиране на стенд за куплиране на осветителя, Изработка на детайлите на стенда, изработвнае на процедура за асемблиране. 6. Асемблиране на компонентите - Проектиране на стенд за измерване и тестване на модула с лазерен измервател, Изработка на стенда, Измерване на модула. 7. Електронно управление на оптическия модул - патенто и литературно изследване на най добрите образци, Разработка на електронната схема за управление , симулиране на модули от електроната схема на протел, Разработка и трасиране на четирислойна платка, 3Д моделиране на платката с всички компоненти, поръчка за изработка на платката, изработване на програма за насищане на платката с елементи, насищане на платката, измиване на платката, електрическо тестване. 8. Електронно управление на OLED 1,5 inch color с клавиатура 3 бутона - Разработка на електронната схема за управление на Протел, симулиране на модули от електронната схема на протел, Разработка и трасиране на четирислойна платка, 3Д моделиране на платката с всички компоненти, поръчка за изработка на платката, изработване на програма за насищане на платката с елементи, Насищане на платката, измиване на платката, електрическо тестване. 9. Софтурер за управление на оптичния модул - изработване на техническо задание за програмиста.
|
0.00
|
0.00
|
| Дейност 4 Създаване и тестване на прототип на образен цитометър "Hand-held" с функция за телемедицина за хуманни медицински изследвания : Дейността ще премине през следните етапи:
1. Анализ на резултатите от изследванията и документацията за модулите и китовете.
2. Избор на работещи варианти и функции за прототип за телемедицина
3. Изработка на техническа документация за асамблиране на прототип от готови компоненти
4. Асамблиране на прототип за телемедицина
5. Настройка и калибриране на прототипа
6. Тестване на прототипа в лабораторна среда с разработените китове за общ брой левкоцити и за живи и мъртви левкоцити в кръв.
7. Тестване на прототипа в лабораторна среда с разработените китове за малария в проби от кръв.
8.Тестване на прототипа в лабораторна среда с разработените китове за определяне активността на стволови клетки, използвани при трансплантация.
9. Определяне на основните характеристики на всеки анализ, проведен на прототипа.
10. Реинженеринг на неудачните компоненти с последващо тестване в лабораторна среда.
11. Изчисляване на статистическите грешки на анализа.
11. Интегриране на облачния софтуер в система заедно с прототипа
12. Изработка на ръководство за работа с прототипа
13. Изработка на ръководство за работа с облачния софтуер
14.Тестване на проототип-системата в полеви условия с телемедицина от медицински институт
|
0.00
|
0.00
|
| Дейност 5. Създаване и тестване на прототип на образен цитометър "Hand-held" с биотехнологично приложение : Дейността ще премине през следните етапи:
1.Анализ на резултатите от изследванията и документацията за модулите и китовете.
2.Избор на работещи варианти и функции за прототип за телемедицина
3.Изработка на техническа документация за асамблиране на прототип от готови компоненти
4. Асамблиране на прототип за телемедицина
5. Настройка и калибриране на прототипа
6. Тестване на прототипа в лабораторна среда с разработените китове за общ брой дрожди и живи и мъртви дрожди.
7. Тестване на прототипа в лабораторна среда с разработените китове за общ брой бактерии и живи и мъртви бактерии.
8. Реинженеринг на неудачни компоненти с последващо тестване в лабораторна среда
9. Интегриране на облачния софтуер в система заедно с прототипа
10. Изработка на ръководство за работа с прототипа
11. Изработка на ръководство за работа с облачния софтуер
12.Тестване на прототип-системата в производствени условия с и дистанционно наблюдение от квалифициран специалист.
|
0.00
|
0.00
|
| Дейност 6 Създаване и тестване на прототип на образен цитометър "Hand-held" за броене и диференциране на соматични клетки в краве мляко : Дейността ще премине през следните етапи:
1. Анализ на резултатите от изследванията и документацията за модулите и китовете.
2. Изработка на техническа документация за асамблиране на прототип от готови компоненти
3. Асамблиране да прототип за млечната промишленост
4. Настройка и калибриране на прототипа
5. Тестване на прототипа в лабораторна среда с разработените китове за определяне на общ брой соматични клетки.
6. Тестване на прототипа в лабораторна среда с разработените китове за диференцирано определяне на соматични клетки (неутрофили, макрофаги).
7. Тестване на прототипа в лабораторна среда с разработените китове за определяне на общ брой бактерии и броя на живи и мъртви бактерии.
8.Реинженеринг на неудачни компоненти с последващо тестване в лабораторна среда
9. интегриране на облачния софтуер в система заедно с прототипа
10. изработка на ръководство за работа с прототипа
11. изработка на ръководство за работа с облачния софтуер
12. Тестване на прототип във фермерски условия и с дистанционно наблюдение от квалифициран специалист |
0.00
|
0.00
|
| Дейност 7 - Закупуване на ДМА : Дейността включва закупуването на следните ДМА:
1. двуканална система за измерване на дебелината на микрофлуидни камери с два сензора - 1 бр. - Основно при производството на опитните образци на CD базираните микрофлуидни камери трябва да се измерва прецизно с точост до нм дебелината на горната прозрачна част и най вече растоянието между двете шприцвани плоскости след лазерното им заваряване една към друга. Дебелината на камерата образувана между двете плоскости след заваряването не трябва да се отклонява с повече о1-2 микрометра от предвидената. Всяка микрофлуидна камера трябва да се измерва по време на производството със специализирана двудатчикова система за измерване. Без измерване на това растояние точността на броене на клетките не може да се гарантира поради варирането на обема на измерваната проба .
2. Шпиндел с ултрависока скорост - Производството на формообразуващите повърхности за шприцване на прозрачния и непрозрачн диск на CD базиран микрофлуиден диск се извършва чрез сложен процес наречен микромашининг на така наречения диамантен стругов 5 осен център. Обикновенанта обработка става с обороти до 20000 в мин и аксиално преместване 10-20 мкм. За обработка на оптични повърхности изискващи гладкости от 40 нм и по ниски, единствения начин за получаването им е специален шпиндел с обороти над 60000 об за мин и аксиално „биене” под 40 нм. Ако не се осигури такава точности гладкост на повърхностите изображението получено от образния цитометър ще е размазано и софтуера няма да изброи с необходимата точност клетките.
3. Топлоканална система с дюзи за прецизионно шприцване за Електрически шприцавтомат 2 бр - Обикновено при шприцване на конвенционални детайли, не се използват топлоканални дюзи. Когато се шприцват прецизни детайли с оптични повърхности шприцването става предпочитително с такива дюзи. Предимствата са много. Не е нужно последващо трудоемко и некачествено обрязване на леяците защото при шприцването с топлоканални дюзи няма такива. Детайлите не се изкривяват и са по прецизни. Липсата на леяци води до икономия на скъпи отични пластмаси. Скоростта на шприцване се увеличава и се намалява цената на консуматива основна цел на разработката.
4. ултразвукова приставка за ЦНЦ с цифров генератор - Много от компонентите на образен цитометър са изработени от оптично стъкло или сапфир или керамика. Единствения надежден и производителен начин на обработка на такива материали е с ултразвуковто обработване със специални инструменъи с димантени частици. Чрез закупувне на ултразвукова приставка за CNC машина с ултразвуков генератор ще може да се обработи основен елемент на оптическата система, като сапфирофото прозорче за да му се направи фаска и отвори за закрепване.
5. Лазерна установка за заваряване на CD базирани микрофлуидни дискове. - Основна дейност при разработката и производството на CD базирания микрофлуиден носител е заваряването на горната прозрачна с долната непрозрачна повърхности чрез лазерна система с лазер |
199 000.00
|
199 000.00
|
| Дейност 8 Придобиване на специализиран софтуер: По тази дейност се предвижда покупка на четири вида софтуер необходим за да може да бъде разрабоен прототипът на нашата иновация
1. Специализиран софтуер адаптиран за образни цитометри - 1 бр.
Медицинските образни цитометри през последните 5-6 години придобиват голяма популярност в лабораторните изследвания и са обект на стандартизация. На повечето апарати освен специализирания софтуер се инсталира и стандартизиран софтуер позволяващ раезултатите да се пренасят и разглежда на различни платформи. За да стандартизираме използването на ханд хелд цитометъра е желателно да прилагаме и такъв софтуер.
2. Софтуер за управление на лазерно заваръчни установки за управление на разработваните установки за лазернозаваряване на СД базирани микрофлуидни чипове - 1 бр. - За производството на прототипа е необходимо да се закупи индивидуално разработен софтуер управляващ установката на за лазерно заваряван
3. специализирана програма за 3D обработка повърхности - Производството на микрофлуидни чипове става със специални вложки обработени на 5 осна цнц машина за диамантено обработване на никелни вложки За да се направят «фрее форм» оптични повърхности е нужно да се проектира повърхността чрез използването на специален софтуер който генерира и управляваща програма за цнц машината.
Стъклените или полимерни лещи също се обработват на такъв струг. Управляващата програма за производството на лещи с произволна форма се генерира от същия софтуер.
Софтуера е универсален и с него могата да се генерират всякакви оптични повърхности необходими при производството на прототипа на „Ханд Хелд” устройството.
4. Софтуер специализиран за разчет на оптични многослойни покрития - този софтуер е жизненонеобходим за да могат да бъдат компютърно моделирани тънкослойните филтри на Ханд хелд устройтството |
99 900.00
|
91 310.00
|
| Дейност 9 Защита на индустриална собственост на национално и международно равнище : Дейността се предвижда с оглед на това да бъде подсигурена патентна защита на нашата иновация, както на национлно, така и на международно равнище. Необходимостта от патентна защита на нашата революционна идея в диагностиката е продиктувана от това да се предпазим от конкуренцията в насока тя да не може да копира нашият продукт и да минимизираме вероятността нашата иновация да бъде копирана. Досегашният опит на фирма Милкотроник ООД показва, че един от ключовит еомоменти при разработката на иновация е нейната патентна защита, което в голяма степен гарантира успешната реализация на иновативният продукт.
Дейността ще премине през следните поддейности:
Извършване на проучване - състояние на техниката и изобреталеска стъпка - това проучването се извършва в достъпните бази данни с патент
ни публикации, като обхваща публикувани заявки за патенти към датата на възлагане на проучването. Проучването се извършва чрез кръстосано проуч
ване по ключови думи, определени от съществени елементи на проучваният обект конструктивни елементи /ако се търси патентна защита за устройство/
и операции / ако се търси патентна защита за метод, технология за производ-водство на даден продукт/.
Изготвяне на заявка за патент- По възлагане от Възложителя се изготвя описание за патент, като се използва един или няколко от намерените патентни публикации като ниво на техниката, както и актуална информация, чертежи, скици, писмени обяснения за начина на работа на устройството или характерни признаци, параметри на предложената технология, обект на патентна защита.
Такса за подаване на международна заявка - включваща такса заявване и такса проучване - това включва такса за заявяване /Filing fees/ - 2300,00лв, представляващи равностойността на официалната такса от 1330 CHF (заплаща се в Швейцария, WIPO)
- такса за предварително проучване /Search fees/ - , представляващи равностойността на официалната такса от 1900 Euro (заплаща се в European Patent Office, Munchen, Germany) |
9 300.00
|
9 299.99
|
| Дейност 10 Разработване на технологии за синтезиране на флуоресцентни багрила. Синтез на производно на багрило от цианиновата група в червената област на излъчване, за мъртви клетки. Синтез на производно на багрилото от цианиновата група в синята област на излъчване, за мъртви клетки. Синтез на багрила за живи и мъртви клетки - YO, TO, YO3, TO3, PO.
: Багрилата са маркерите , които правят възможно обекта на изследване от флуоресцентния образен цитометър да бъде идентифициран.
Поради факата, че нито екипът на Милкотроник ООД. нито партнъорът имат капацитета да разработят флуоресцентни багрила то се налага тази дейност да бъде възложена като външна услуга за синтезиране на следните флуоресцентни багрила:
1. синтез на производно на багрило от цианиновата група в червената област на излъчване, за мъртви клетки
2. синтез на производно на багрилото от цианиновата група в синята област на излъчване, за мъртви клетки
3. синтез на багрила за живи и мъртви клетки - YO, TO, YO3, TO3, PO
4. синтез на генерично Alexa 488 багрило за свързване с протеини
Технологиите за първите две багрила ще бъдат оригинални и намерението е те да бъдат патентовани. Технологията на багрилата за живи клетки YO, TO, YO3, TO3, PO са известни и тези багрила ще бъдат получени за приложение за разработването на китове. Патентът за генерично Alexa 488 багрило е с изтекъл срок. Това багрило ще бъде синтезирано, за да се осигури маркер на антителата и да се получат конюгатите необходими за китовете за определяне активността на стволовите клетки, за диференциално определяне на соматични клетки (неутрофили, макрофаги). .
Стъпките по синтеза на флуоресцентните багрила са следните:
Задача 1. Патентно и литературно изследване за синтез на две багрила от цианиновата група. Ще бъде направено патентно и литературно проучване на всички синтези на багрила от цианиновата група. Ще бъдат изготвени варианти за синтез на два нови деривати на цианиновите багрила, единият да има излъчване в червената област, а другия в синята област.
Задача 2. Идентифициране на необходимите химикали.
Задача 3. Синтезиране на производни от цианиновата група с излъчване в синята и в червената област. Разполагаме с необходимата апаратура за синтез на багрилата. Необходимо е само да бъдат закупени реактивите. Процесите са многоетапни. Ще се проследи влиянието на температурата, времето, разтворителите върху качеството и добива на реакционния продукт на всеки етап. На всеки етап ще се приложи пречистване на междинните продукти и на крайния чрез хроматографски метод (HPLC-Agilent) и на флуоресцентен спектрофотометър (Perkin Elmer LS-45).. Синтезът на получените нови деривати ще бъде патентован. Тези багрила ще бъдат иновативни продукти и ще бъдат използвани за анализ на мъртви клетки.
Задача 4. Синтез на багрила за живи клетки YO, TO, YO3, TO3, PO.
Методиките за синтез на тези багрила от цианиновата група са познати от литературата и са с изтекли патенти за използване. Ще бъдат получени 5 различни багрила за живи клетки. И тук ще бъдат проследени факторите, които влияят на качеството и добива на всяко багрило. На всеки етап ще се приложи пречистване на междинните продукти и на крайния чрез хроматографски метод (HPLC-Agilent) и на флуоресцентен спектрофотометър (Perkin Elmer LS-45).
Задача 5. Синтез на генерично Алеха488 по изтекъл патент за конюгатите в китовете. Синтезът на това багрило е известен и срокът на неговия патент е изтекъл. Ще бъде синтезирано багрилото като отново ще се определят оптималните условия за реакцията, ще бъде пречистено и доказано по-горе споменатите методи.
Задача 6. Приборно изследване на багрилото - /ЯМР/ спектрометър ; точка на топене; взаимодействие на багрилото с микробни клетки и изолирана ДНК; изследване за цитотоксичност. За да се докаже чистотата на получените багрила ще се анализират проби от тях с ЯМР спектрометър, в СУ „Климент Охридски” , ХФ. Чистотата на багрилата се доказава и чрез измерване на точката на топене. Ще бъде изследван афинитета на свързване на багрилата към ДНК и скоростта на свързване чрез флуоресцентен спектрофотометър (Perkin Elmer LS-45). Отделно ще се проследи оцветяването на живи и мъртви клетки от получените багрила на флуоресцентен микроскоп. Ще бъдат изследвани всички багрила за цитотоксичност.
|
29 500.00
|
29 500.00
|
| Дейност 11 Разработка на Интернет облачно базиран софтуер за съхраняване, статистически анализи и документиране на получените данни за телемедицина с използване на комуникационни технологии: За да бъде възможно осъществяването на телемедицина ще бъде създаден облачно базиран софтуер за съхраняване, статистически анализи и документиране на получените данни. Системата ще се състои от 2 части: образен цитометър (клиент), измервателното устройство, което изпраща данните и сървър (облачен софтуер), който получава данните, съхранява ги, прави статистически анализи върху тях и нужните обработки. Сървърът ще се състои от два модула: служебен и потребителски. За целта ще бъде създаден служебен модул, който да включва база данни, в която ще се съхранява всичката информация на системата – резултати от измерванията, снимки, получени от образния цитометър, информация за пациенти, потребители и т.н. След това ще бъде изграден потребителския модул, който ще бъде реализиран на 3 нива:
1. администраторско ниво – пълен достъп до ресурсите на системата, възможност за задаване на настройки, редактиране права на потребители и т.н
2. наблюдение от лекар - възможности за вход в системата (автентикация), визуализация на натрупаните данни за пациент(и), преглед на снимките, получени от образния цитометър, статистически анализи и документиране на получените данни.
3. Пациент – достъп до неговия профил, преглед на поставени диагнози
Системата ще функционира, като клиента и сървъра си комуникират през интернет по избран предварително протокол. Тези протоколи предварително ще се разработят. Клиентът, след като завърши измерването, изпраща данните към сървъра,където крайният потребител (лекар), след автентикация, има достъп до събраната информация за пациенти, разглежда снимките на измерените проби и взима крайно решение за необходимост от лечение. Накрая така изградената система ще бъде тествана на практика за да се осъществят комуникациите и да се докаже готовността на системата. По подобен начин облачната система може да бъде използвана за наблюдение и управление на изследванията и в биотехнологични производства и за контрол на мастита в различни ферми.
Образния цитометър заедно с управляващия таблет ще са свързани посредством 3G модул или вай фай с интернет и чрез софтуерна програма с „облака” за осъществяване на дистанционни и телемедицински функции дублираща инсталираната в мини писи то.
Чрез интегрирания в устройството хардуерен модул ще се осъществява "Wi-Fi Direct за мрежова свързаност към устройства базирани на андроид и уйндос, като смартфони, планшети таблети за безпроводно наблюдение и управление на устройството.
В персоналния образен цитометър е прдвиден най съвремения скоростен безжичен интерфейс чрез който ханд хелд образеня цитометър изпраща снимките от микроскопа към персонални устройства например планшетни телефони или таблети а при наличие на вай фай мрежа свързана с интернет без да преминава през междинен персонален компютър се свързва с интернет и облачните структури.
При липса на наземен интернет, вграден 3G модул осигурява свързване към интернет и облачния софтуер. В много от страните в третия свят даже в отдалечените райони е изградена функционираща 3G мрежа. При наличието на такова покритие специалистите намиращи се в града могат да наблюдават анализирането на пробите он лайн чрез облачната структура и да обслужват няколко анализатора едновременно. Например могат да изпратят неквалифицирани медицински работници в отдалечен район за изследване на населението за малария, да наблюдават резултатите от тестовете и в зависимост от резултата за количеството на паразитите в кръвта веднага да назначат адекватно лечение. До сега нито един от образните цитометри не притежава подобни възможности.
|
0.00
|
0.00
|
| Дейност 12 Изпробване на системата в операционна среда: Изпробването на разработената система по проекта в операционна среда ще бъде една от най-отговорните дейности по проекта, която ще покаже напълно потенциалните възможности на системата в реална среда. Ще бъде направена пълна демострация на действието на разработените три прототипа флуоресцентни образни цитометри, на разработените флуоресцентни багрила, на разработените китове, на телемедицинската функция на устройството и на функциите за наблюдение и управление на получените данни от измерването. Тази дейност ще се изпълнява към края на проекта, в последните 2 месеца. Ще бъде нает квалифициран персонал от фирма Милкотроник, които преди това са разработили китовете, тествали са китовете и прототипите и имат добър опит за работа с тях - 4 експерти (3 биотехнолози и 1 инженер химик), както и по един специалист от лабораториите към предприятията, болниците, където ще се правят демонстрациите. Ще се използват разработените три прототипа и разработените китове по проекта за медицински цели, за биотехнологични и за приложение в млечната промишленост и ветеринарната медицина.
Трите прототипа ще се демонстрират в производствена реална среда - медицинска лаборатория на пункт за приемане на кръв, в животновъдна ферма, в лабораторията на пивоварна, в лабораторията на фабрика за производство на биоетанол. Резултатите ще са оформени в отчет съдържащ изследване на коефициента на вариации на отделните измервания с цел да се докаже точността и възпроизводимостта на анализите. Ще бъде направено сравнение с конвенционалния, референтен метод използван съответно в различните медицински и биотехнологични лаборатории и предприятия. Ще бъде наето пространство в облак. Ще се инсталира софтуера разработен по проекта за обработка на данните от полевите устройства и тяхното он лайн дистанционно управление и наблюдение от специалисти в отделните области. Ще се осъществи дистанционно управление и наблюдение от избрани специалисти намиращи се в различни институти на територията на България.
1. Специалист-клиницист от Медицински университет, който ще осъществи наблюдение и управление на телемедицинско изследване на кръводарители в пункт за приемане на кръв и кръвни проби в медицинска лаборатория.
2. Специалист-биотехнолог от Университет „проф. д-р Асен Златаров”- Бургас, който ще осъществи наблюдение и управление на процеса ферментация при производството на пиво в гр. Шумен
3. Специалист-ветеринарен лекар от Тракийския Ветеринарен Университет , който ще извърши телемедицинско изследване на състоянието на фермерско стадо от крави за наличието на бактериален мастит, на дрождеви мастит и микоза. Едновремено ще се изследва и броя на бактериите на проверяваното мляко.
Посредством Софтуера в облака ще се формират отчети за изследванията, които ще се разпечатат, архивират и онлайн ще се изпратят на лабораториите участвали в демонстрацията на системните прототипи в отделните оперативни среди. Ще се направи видео отчет на процеса на използване на прототипите в медицинската лаборатория, производствената фабрика за пиво и във фермата. Ще се заснеме и видеоклип демонстриращ работата на специалистите по дистанционо управление, наблюдение и анализ на даните от трите прототипа флуоресцентни образни цитометри "Hand-held".
Този краен етап на проекта убедително ще покаже значимия социален ефект на проекта, осигуряването на здравни услуги от разстояние, осигуряване на по-лесно, навременно наблюдение и по-кратко време за реакция, тъй като данните се предават в реално време, нови възможности за наблюдение и контрол не само в хуманната и ветеринарна медицина, но и в биотехнологичните производства и в млекопреработващата промишленост.
|
0.00
|
0.00
|
| Дейност 13 Визуализация на проекта : Дейността за визуализация и публичност на проектното предложение стартира през 1 м. от изпълнение на проекта. Период на изпълнение 24 м.
Цел на дейността е даване на широка гласност и информираност за изпълнението на проекта и съфинансирането му от страна на ЕФРР на ЕС. При изпълнение на всички мерки и действия по визуализация на проекта "Милкотроник " ООД ще спазва изискванията, описани в Единен наръчник на бенефициента за прилагане на правилата за информация и комуникация 2014 - 2020 г. Във всички мерки за информация и комуникация, предприети от дружеството, изрично ще се указва съфинансирането от фондовете на ЕС на проекта, чрез поставяне на емблемата на ЕС в съответствие с техническите характеристики, посочени в акта за изпълнение, приет от Европейската комисия, с упоменаване на Европейския съюз и ЕФРР, който оказва подкрепа на проекта. Дружеството ще информира обществеността за получената подкрепа като включи на подходящо място на своята интернет страница подробна информация за одобрения за финансиране проект. Публикацията ще бъде направена в рамките на три дни от датата на сключване на договора за безвъзмездна помощ. Материалът ще съдържа минимум следната информация: емблемата на ЕС; упоменаването „Европейски съюз“; наименованието на ЕФРР; общото лого за програмен период 2014-2020 г., със съответното наименование на финансиращата програма; наименованието на проекта; общата стойност на проекта, както и размера на европейското и националното съфинансиране, представени в български лева. Дружеството ще упомене финансовия принос, предоставен от ЕФРР чрез ОПИК във всяка информация, предоставяна на широката общественост, във вътрешни и годишни доклади, в каквито и да е документи, свързани с изпълнението на проекта и при всякакви контакти със средствата за масово осведомяване. Във всеки документ, свързан с изпълнението на проекта ще бъде посочено, че финансиращата го ОПИК се осъществява с подкрепата на ЕФРР. При потенциални публични изяви и интервюта на представители на дружеството, свързани с проекта, ще се подчертаят ролята на Общността за осъществяването на проекта чрез ОПИК, както и стойността на безвъзмездната финансова помощ. При отчитане изпълнението на проекта, както и при проверки на място, "Милкотроник " ООД ще предостави на УО доказателствен материал за предприетите от него мерки за информация и комуникация. Дейностите по информация и публичност ще допринесат за преодоляване на липсата на ангажираност от страна на всички заинтересовани страни и обществото за своевременно информиране и активизиране на гражданското участие и диалог, както и ще спомогнат за постигане на висока степен на информираност на обществеността относно проектните дейности и помощта, получена от Европейския фонд за регионално развитие.
|
306.00
|
306.00
|
| Дейност 14. Закупуване на реагенти и консумативи.: Общата сума за закупуване на реагенти за разработване на всички китове по проекта е 30 000 лв.
Ще бъдат необходими реагенти за разработване на медицински китове, за биотехнологични китове и за китове използвани за млечната промишленост.
1. Реагенти за медицинските китове - обща сума 10 031,94 лв.
За разработването на медицинските китове ще са необходими значителен брой реагенти, които ще бъдат закупени като консумативи. Направен е анализ за необходимите реагенти. Реагентите ще бъдат закупени от фирми, съобразно свойствата и цената на реагентите. В това направление медицински китове ще се разработят три вида тестове – за определяне на активността на стволовите клетки, тестове за диагностика на малария и тестове за анализ на левкоцити.
- Oбщата сума за консумативи за разработване на китовете за определяне активността на стволовите клетки е 7772,94 лв.
2. Реагенти за разработването на биотехнологичните китове - обща сума 5186,4 лв
В направлението биотехнологичните китове ще се разработят два вида китове – за определяне общ брой дрожди и брой на живи и мъртви дрожди, и за определяне общ брой бактерии и диференцирано определяне на живи и мъртви бактерии.
- Общата сума за реагенти за разработване на кита за дрожди е 1678,68 лв. За разработването на кита за дрожди са необходими следните флуоресцентни багрила: акридин оранж (цинкова сол), пропидиев йодид, флуоресцеин диацетат за багрене на клетките и подходящ разтворител диметилсулфоксид анхидрид. За да се определи общия брой на дрождите се налага да се умъртвят всички клетки с реагентите цетилпиридиниев хлорид монохидрат, тритон Х-114 и тритон Х-100. За да се предотврати агрегацията на клетките са необходими динатриев дихидроген комплексон, натриев бикарбонат и тетранатриев комплексон.4H2O.
- Общата сума за реагентите за разработване на кита за бактерии е 3507,72 лв. За разграждането на мазнините и протеините, които имат неблагоприятен матричен ефект на анализа се използват следните реагенти - алкална протеиназа, амониев формиат, валоксен 110 и липаза. Необходими са и мембранни филтри за стерилизацията на разтворите.
3. Реагенти за разработване на китовете за млечната промишленост - обща стойност 12 568,72 лв
В направлението разработване на китове за млечната промишленост са необходими консумативи с обща сума 12668 лв. Ще се разработват два вида кита - за определяне общ брой соматични клетки и за диференцирано определяне на соматични клетки (неутрофили и макрофаги).
Необходимо е да се използва Ficoll-Paque Premium за да се изолират различни видове клетки в млякото. За доказване на изолираните клетки се прилагат багрилата Eosin Y и Giemsa и те се наблюдават със светлинен микроскоп. За китовете е необходимо да се маркират антитела с флуоресцентните багрила Флуоресцеин 5(6)-изотиоцианат и Пропидиев йодид. За получаването на поликлонални антитела са необходими Адювант на Фройнд непълен и пълен. Пречистването на антителата се извършва с HiTrap колонка с Protein G HP и Сефадекс 25 за гелна хроматография. За доказване на активността на антителата се използва вторично антитяло маркирано с пероксидаза и водороден пероксид (30%) и тетраметилбензидин. необходими са и различни видове реагенти за приготвяне на буфери като натриев цитрат дихидрат, натриев бикарбонат, натриев фосфат, глицин хидрохлорид, натриев фосфат дибазик и калиев фосфат монобазик.
4. Реагенти за синтезиране на флуоресцентните багрила - обща сума 2 213 лв.
Необходими реагенти за синтезирането на заплануваните флуоресцентни багрила са бензотиазол, меркаптобензотиазол, бензоксазол, метилпиридин, хинолин, триетилендиамин, моноетаноламин, диметилсулфат, дийодпропан, метилйодид, дифенилформамидин, дихлорметан, диетилов етер и др.
Информация за цената на реагентите може да се получи от следните линкове: http://www.sigmaaldrich.com, https://www.fishersci.com, http://www.abcam.com, https://www.biolegend.com и др.
|
30 000.00
|
27 787.06
|
| Дейност 15 Закупуване на материали.: За да може да се изготив прототипа на Ханд хелд устройството са необходими следните материали:
1 Закупуване за диамантени материали - 2 5 бр.- Най съвременната тенденция за производство на микрофлуидни чипове и оптични лещи е директно фрезоване и струговане на различни материали които не могатили е трудно да се обработят с карбидни ибструменти. Единствения материал способен да обработи стъклени керамични и никелови повърхности с гладкост до 4 нм е диамантът естествен или искуствен.
2. закупуване на материал за матрици 12 бр. - за корпуса на образния цитометър, силиконовата клавиатура и микрофлуидния чип ще се проектират и произведат в Милкотроник 5 броя матрици за шприцване. За производството на тези матрици се използват стандартизирани елементи. След проектирането ще се закупят набори от метални елементи и суров материал за дообработка
3. Материали за филтри - 5 бр.
4. Течни лещи - 2 бр.
5. Обективи - 4 бр.
6. Дисплей - 1 бр.
7. Електронни елементи за платка - 2 бр.
8. Лещи - 2 бр. |
29 700.00
|
29 699.96
|
